从寄主昆虫血淋巴中分离纯化病原真菌菌体的方法
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Q26

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教育部新世纪优秀人才支持计划资助(NCET-04-85)


Separation and Purification of Fungal Cells from the Haemolymph of Mycosed Insect
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    采用正交实验方法,对东亚飞蝗(Locusta migratoria)血细胞裂解及其DNA和RNA降解的条件进行了优化.在优化条件下,不仅去除了感病东亚飞蝗血淋巴中的血细胞及DNA和RNA。而且成功地分离和纯化了绿僵菌(Metarhizium anisopliae)菌体.裂解血细胞及其DNA和RNA的最佳酶解条件为:蛋白酶K的浓度为1mg/mL,作用温度为26℃,时间为60min,脱氧核糖核酸酶(DNAase I)的用量为5U,核糖核酸酶(RNAaseA)的浓度为0.5mg/mL,作用时间为35min,作用温度为30℃.以蝗虫特异引物进行PCR及RT-PCR检测结果表明,从绿僵菌侵染后的蝗虫血淋巴中分离纯化无蝗虫DNA和RNA污染的绿僵菌菌体,为后续分离和克隆绿僵菌侵入蝗虫体内后表达的基因,研究它们在致病机理中的作用奠定了基础.

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李春梅 张沧桑 王中康 彭国雄 殷幼平 曹月青 夏玉先.从寄主昆虫血淋巴中分离纯化病原真菌菌体的方法[J].重庆大学学报,2006,29(10):109-113117.

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  • 收稿日期:2006-05-18
  • 最后修改日期:2006-05-18
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